English真空系统是惰性气体手套箱的重要组成部分之一，也是使之达到高可靠性的气密性封装条件的关键部分，它对手套箱正常工作有着非常重要的意义。
手套箱的真空系统主要有真空管道、截止阀门、真空泵和真空规共同构成，其中最核心的部分就是真空泵。手套箱配备的真空泵有好几种用途，分别是真空烘箱抽真空、真空传递箱抽真空、手套箱体负压获得和氮气纯化系统再生抽真空。而不同类型的真空泵会对手套箱的工作产生不同的影响，一般来说，配初级机械泵就能保证手套箱的正常工作状态，通常可选择干泵或油泵；不过，除此之外还有配分子泵等高真空泵，应用于高真空场景。真空泵的选择取决于具体的应用要求，如抽气速度、极限压力和气体兼容等，像一些高端用途的真空烘箱可能会要求配高真空泵（比如分子泵），目的是为了更快速的去除水汽。
真空/压力计的作用是测量手套箱内的压力。手套箱上使用的真空/压力规需要根据真空度或压力监测要求来配置。监测真空烘箱或传递箱内部是否处于（粗）真空或大气压力环境时，采用压力计；监测真空烘箱的极限真空度或工作真空度时，采用皮拉尼真空规。如果配了高真空泵，那通常还要配备相应的高真空规，比如离子规。
在手套箱的使用过程中，对真空的要求并没有统一的标准，通常箱体内的水、氧均达到1PPM以下即可满足绝大多数用途，这样便能保证整个系统始终保持高洁净和高纯度的惰性气体环境。